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細胞操作流程復蘇1.將恒溫水浴鍋中的水預熱到37℃;2.從液氮罐中取出要復蘇的細胞,盡快轉入恒溫水浴鍋中復溫,不斷震蕩凍存管以提高復溫速率;將融化了的凍存管中的用移液管轉入一直裝有5ml*培養基的15ml離心管中,充分混勻后,300g離心5min;3.離心完成后棄去上清,用1ml*培養基重懸細胞后,轉入T-25細胞培養中,再加*培養基4ml,之后轉入CO2培...
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轉染(Transfection)是指將DNA或者RNA導入真核細胞中的過程。轉染的目的是產生重組蛋白,或特異性增強或抑制轉染細胞中的基因表達。細胞轉染有哪些類型和方法呢?1)根據導入的核酸存在于宿主細胞的時間長短,可以分為瞬轉和穩轉。瞬轉穩轉導入的DNA沒有整合到基因組中,而是保留在細胞核上導入的DNA整合到基因組中導入的遺傳物質不傳遞到子代;遺傳改變只是暫...
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細胞培養基的構成中動物血清對細胞的生長繁殖起著重要作用。在動物血清中牛血清的應用又是zui廣泛的,所以想要細胞在培養過程中長的好、穩定,牛血清的質量好壞直接影響生物研究的質量和安全性,使用質量好的牛血清也是細胞培養中的重要環節。血清是提供生長激素、營養物,以及低分子營養物;提供結合蛋白;能結合或調變它們所結合的物質活力;是細胞貼壁、鋪展生長所需因子的來源;起...
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養細胞可謂是個精細活,從事養細胞的人都知道養細胞的時候一旦不注意,就很容易造成細胞污染,所以想要養好細胞除了小心謹慎以外,還要提前做好準備:細胞培養前的準備1)在帶上手套開始細胞培養之前,先檢查一下移液管和瓶子的數量是否充足,以免在開始實驗后再次出入操作臺,這樣可以降低細胞污染的風險。2)細胞培養基也應先預熱,選擇只預熱部分培養基而非整瓶加熱,不但可以節約實...
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在制作原代細胞免疫熒光時,容易出現一些問題,造成熒光鑒定失敗,將抗原或抗體標記上熒光素,制成熒光抗體檢測組織或細胞內的相應抗原(或抗體)時,一定要注意抗體的比例高低和濃度。制作免疫熒光常用的方法有:方法一:直接法步驟:將熒光標記的特異性抗體(抗原)直接加在抗原(抗體)上,經一定的溫度和時間染色,水洗—干燥—封片—鏡檢優點:操作簡便、特異性高、非特異性染色少缺...
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