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YAC-1是一個淋巴瘤,將Moloney白血病病毒(MLV)接種到新生A/Sn小鼠中生成。 細胞對NK細胞的活動敏感,對NK細胞活性檢測十分有用。檢測表明肢骨發育畸形病毒(鼠痘)陰性。
細胞特性
1) 來源:Moloney鼠科白血病毒(Mo-MuLV)感染;淋巴瘤
2) 形態:淋巴母細胞,懸浮生長
3) 含量:>1x106 個/mL
4) 污染:支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性
5) 規格:T25瓶或者1mL凍存管包裝
運輸和保存
可選擇干冰運輸及發送復蘇存活細胞方式:
(1)干冰運輸,收到后立即轉入液氮或者-80度冰箱凍存或直接復蘇;
(2)存活細胞,收到后應繼續生長,傳代達到細胞生長狀態良好時,再進行凍存。具體操作見細胞培養步驟。
(3)收到細胞后請拍照,3天內如果發現污染,請及時拍照與我們聯系。
細胞接收后的處理:
1) 收到細胞后,請檢查是否漏液,如果漏液,請拍照片發給我們。
2) 請先在顯微鏡下確認細胞生長狀態,酒精消毒瓶壁并將T25瓶置于37℃培養約2-3h。
3) 將T25瓶中的培養基離心后,去上清,添加6ml新的*培養基,加入新的T25瓶中繼續培養。
4) 如果細胞長滿80%請及時進行細胞傳代.
5) 接到YAC-1 小鼠淋巴瘤細胞/鏡像綺點(iCell)次日,請檢查細胞是否污染,若發現污染或疑似污染,請及時與我們取得聯系。
細胞用途:僅供科研使用。
細胞培養操作規程,供參考
一.培養基及培養凍存條件準備:
1) 準備RPMI-1640培養基;胎牛血清,10%;雙抗,1%。
2) 培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配。
二. 細胞處理:
1) 復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2) 細胞培養 :可通過添加新的培養基或換液來維持細胞的生長,推薦細胞的初始細胞密度為3 X 105 cells/mL。維持細胞的生長密度為2 X 105 -2 X 106 cells/mL。
3) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
1. 將細胞懸液按1:2到1:5比例分到新皿中或者瓶中,補加培養基至6ml,放入培養箱繼續培養。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。
下面T25瓶為類;
1,細胞凍存時,取上清,可使用血球計數板計數。
2,4min ,1000rpm 離心去掉上清。加1ml血清重懸細胞,根據細胞數量加入血清和DMSO,輕輕混勻,DMSO終濃度為10%,細胞密度1-2xE6/ml,每支凍存管凍存1ml細胞懸液,注意凍存管做好標識。
3,將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
鏡像綺點(上海)細胞技術有限公司主要產品和服務介紹:
一、原代細胞服務:
各類模式哺乳動物的多種原代細胞資源
多種人源性正常及腫瘤原代細胞資源
原代細胞分離和培養相關試劑、kit、培養基添加劑等
原代細胞相關技術服務及整體實驗外包服務
二、細胞系服務:
細胞株/系培養、增殖、凍存和相關說明書
細胞系培養過程的技術指導
細胞系培養基、添加劑、血清及相關生長因子、試劑等
三、iPS細胞服務:
iPS細胞基礎培養(有滋養層or無滋養層)
iPS細胞增殖及冷凍保存
iPS基礎培養技術實習
新藥及實驗儀器上市前評估
四、其他技術外包服務、客戶定制服務等
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