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小鼠小膠質BV2“一代”指從細胞接種到分離再培養的一段期間,與細胞世代或倍增不同。在一代中,細胞培增3~6次。細胞傳代后,一般經過三個階段:游離期、指數增生期和停止期。常用細胞分裂指數表示細胞增殖的旺盛程度,即細胞群的分裂相數/100個細胞。一般細胞分裂指數介于0.2%~0.5%,腫瘤細胞可達3~5%。接種2~3天分裂增殖旺盛,是活力好時期,稱指數增生期(對數生長期),適宜進行各種試驗。
收到小鼠小膠質BV2后要如何處理?
1、首先,觀察細胞培養瓶是否完好。培養液是否有漏液、渾濁等現象。若有,請拍照,并及時與致備技術支持聯系。
2、用75%酒精擦拭細胞培養瓶表面,顯微鏡下觀察紐胞狀態。因運輸問題,部分貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落;先不要打開培養蓋,將細胞置于細胞培養箱靜置培2-4小時,以便穩定細胞狀態。
3、仔細讀細胞說明書,了解細胞相關信息,如貼壁特性(貼壁/懸浮)、細胞形態、所用基礎培養基、血清比例、所需細胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、如收到的細胞沒有相關培養經驗,建議消化時在顯微鏡下實時觀察消化情況,掌握細胞的最佳消化時間,若3分鐘內無法脫落的細胞,可以在37℃條件下提高胰酶活性,適當延長時間,從加入胰酶到終止消化的過程,所有操作都要迅速。
5、建議收到細胞后的一次傳代比例為1/2最多不要超過1/3。
6、若小鼠小膠質BV2拉絲、黏連則說明消化過度,建議適當縮短消化時間,若發現僅有一半細胞先脫落,則可以優先終止,剩下的繼續消化。