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人胚腎細胞293T是一種廣泛使用的細胞系,也被稱為HEK 293T或293 cells。它最初由Frank Graham和Alex van der Eb于1977年在荷蘭萊頓大學建立。
這種細胞起源于人類的胚胎腎小管上皮細胞,因此能夠表達許多與腎功能相關的基因和蛋白質。293T細胞株可以通過無血清培養、懸浮培養以及有限制性酶消化等方法進行傳代。
一、人胚腎細胞293T接收后要做這些處理:
1、收到細胞后,請檢查發貨培養瓶的狀況,若發現培養瓶破損、有液溢出及細胞有污染,請拍照后及時聯系我們。
2、在顯微鏡下確認人胚腎細胞293T生長狀態時,在低倍鏡(4或5X物鏡)下進行,能準確判斷細胞的傳代密度??醇毎男螒B請在10X和20×物鏡下,同時給剛收到的細胞拍照,(10×,20×)各2-3張以及培養瓶外觀照片一張留存,作為細胞需要售后時提供收到細胞時細胞狀態的依據。
3、觀察好細胞狀態后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養箱放置約2-3h。
4、貼壁細胞:在運輸過程中貼壁細胞會有脫落的現象,如發現貼壁細胞有脫落或者脫落后抱團生長,可將T25瓶置于37℃培養箱放置約2-3h,然后抽出瓶中的培養基和未貼壁細胞1000rpm離心5分鐘,棄去上清重懸后接種到加有按照說明書細胞培養條件新配制的培養基的原培養瓶中(或新的培養瓶中)。
5、懸浮細胞:T25瓶置于37℃培養箱放置約2-3h,然后抽出瓶中的培養基和細胞1000rpm離心5分鐘,棄去上清重懸后接種到新的培養瓶中(加入按照說明書細胞培養條件新配制的培養基)。
6、備注:運輸用的培養基(灌液培養基)不能再用來培養人胚腎細胞293T,請換用按照說明書細胞培養條件新配制的培養基來培養細胞。收到細胞后一次傳代建議1:2傳代。
二、具有以下特點:
1、高轉染效率:由于其雙倍體狀態,在轉染時比單倍體細 胞更容易接受外源DNA并表達。
2、容易獲取且穩定:相較其他已知能夠支持多次分裂生長癌變標準株(如HeLa),293T不能連續無限度地 進行傳代,所以不存在惡性增殖的風險 ,但其仍然保持了高 度穩定性。
3、可應用于研究不同類型病毒感染機理:由于其廣泛應用 于原代細 胞 文化中作為對照組,而新出現的病毒往往沒有可靠 的細胞系可以進行繁殖,因此293T被用于在人類細 胞中表達和復 制不同類型的病毒。
4、適合制備慢病毒載體:由于其能夠高效地產生包含重組基 因的慢 病 毒,所以被廣泛應用于基因傳遞工具之一。